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農(nóng)藥殘留檢測試劑盒根據(jù)國標(biāo)GB/T5009.199-2003,有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酯酶有抑制作用,從而影響乙酰膽堿酯酶、硫代乙酰膽堿(作為底物)、二硫代二硝基苯甲酸(作為顯色液)間的顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)后溶液顏色的深淺即可計(jì)算出樣品中的農(nóng)藥殘留量;如果乙酰膽堿酯酶被抑制程度越嚴(yán)重,則反應(yīng)而生成的黃色化合物也越少,說明檢測樣品中農(nóng)藥殘留越多,反之越少;而生成的黃色物質(zhì)在412 nm處有獨(dú)特的吸收峰,由此可對樣品中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行定量測定。
檢測結(jié)果以乙酰膽堿酯酶被抑制程度(抑制率)表示,計(jì)算公式為:抑制率(%)=(ΔAc-ΔAs)/ ΔAc×100%;式中,ΔAc為對照組3分鐘后與3分鐘前的吸光值之差;ΔA s為樣品組3分鐘后與3分鐘前的吸光值之差。
蔬菜、水果、茶葉、糧食、肉、蛋、奶、水產(chǎn)品等。
檢測下限:1% (抑制率)
檢測范圍:0-100% (抑制率)
生產(chǎn)日期:見外包裝。
保質(zhì)期:12個(gè)月(4℃冷藏)。
① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500ml 蒸餾水中,溶解、混勻即可。
② 底物:往標(biāo)注為底物的瓶中加入10.3ml蒸餾水。2~4oC環(huán)境下冷藏保存。
③ 顯色劑:往標(biāo)注為顯示劑的瓶中加入26ml的緩沖液,輕搖使完全溶解。
④ 酶試劑:酶試劑已配成溶液可直接使用。平常要在2~4oC環(huán)境條件下冷藏保存。
以上試劑不使用時(shí),需放在2~4oC環(huán)境條件下冷藏保存;使用時(shí),從冰箱取出,放置室溫后進(jìn)行檢測。
① 根據(jù)國標(biāo)GB/T5009.199-2003,樣品的抑制率小于等于40%為合格樣品,樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品;
② 抑制率>50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品,表明被測樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn),建議用氣相色譜等儀器分析法作進(jìn)一步確認(rèn)。
蔬菜樣品的抑制率 |
蔬菜品質(zhì) |
評價(jià)和建議 |
0%< 檢測抑制率<15 % |
無污染蔬菜 |
基本上可以放心出口 |
15%< 檢測抑制率<30 % |
綠色蔬菜 |
處理和檢驗(yàn)后可以出口 |
30%< 檢測抑制率<50 % |
無公害蔬菜 |
可以安全食用 |
50%< 檢測抑制率<100 % |
有農(nóng)藥污染蔬菜 |
不能安全食用 |
① 加入底物后,應(yīng)迅速混勻,立即測試。
② 若浸提液清澈無色或顏色較淺,取上清液待測;
若浸提液混濁,離心,取上清液待測;
若浸提液色素干擾嚴(yán)重,可用活性炭脫色,具體方法如下:
將浸提液轉(zhuǎn)移至另一個(gè)三角瓶中,加入0.1~0.5g活性碳(根據(jù)顏色深淺調(diào)整),水浴70℃加熱5分鐘,取出趁熱過濾,濾液待測。
③ 蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時(shí),可采取整株(體)浸提,避免次生物物質(zhì)干擾。
④ 所用的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害,使用時(shí)請做好防護(hù)。不慎沾到皮膚應(yīng)立即擦干并用大量水沖洗。
⑤ 檢測試劑請務(wù)必在2~4oC冰箱保存。