? 1 非洲豬瘟簡介
非洲豬瘟(英文名稱:African Swine fever,簡稱:ASF)是由非洲豬瘟病毒(英文名稱:African Swine fever virus,簡稱:ASFV)感染家豬和各種野豬(如非洲野豬、歐洲野豬等)引起一種急性、出血性、烈性傳染病。非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟科非洲豬瘟病毒屬的重要成員,病毒有些特性類似虹彩病毒科和痘病毒科。病毒粒子的直徑為175-215納米,呈20面體對稱,有囊膜。基因組為雙股線狀DNA,大小170-190kb。在豬體內(nèi),非洲豬瘟病毒可在幾種類型的細胞漿中,尤其是網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞和單核巨噬細胞中復制。該病毒可在鈍緣蜱中增殖,并使其成為主要的傳播媒介。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,該病也是我國重點防范的一類動物疫情。
? 2 非洲豬瘟在我國的發(fā)病情況
自2018年8月3日我國確診首例非洲豬瘟疫情以來,我國已經(jīng)在遼寧、安徽、黑龍江、海南等地接連爆發(fā)非洲豬瘟疫情。盡管非洲豬瘟傳入我國僅幾年的時間,但已經(jīng)在多地接連爆發(fā),造成了巨大的經(jīng)濟損失,而且非洲豬瘟臨床癥狀與豬瘟癥狀相似,只能依靠實驗室監(jiān)測確診。在目前的情勢下,急需一種能對非洲豬瘟進行快速檢測的方案!
? 3 非洲豬瘟病毒(ASFV)實時等溫擴增儀配置清單
項目 |
序號 |
物品名稱 |
型號規(guī)格 |
單位 |
數(shù)量 |
備注 |
主 機 箱 |
1. |
儀器主機 |
HW-ZW16 |
臺 |
1 |
|
2. |
儀器使用說明書 |
|
個 |
1 |
|
|
3. |
合格證/保修卡 |
|
本 |
2 |
|
|
4. |
儀器電源線 |
|
根 |
1 |
|
|
5. |
鋁合金箱 |
|
個 |
1 |
|
|
配 件 箱 |
6. |
電子天平 |
0-500g |
臺 |
1 |
|
7. |
樣品杯 |
50mL |
個 |
24 |
|
|
8. |
移液槍 |
1-5ml |
把 |
1 |
|
|
9. |
移液槍槍頭 |
1-5ml |
包 |
1 |
|
|
10. |
移液槍 |
100μL-1000μL |
把 |
1 |
|
|
11. |
移液槍槍頭 |
100μL-1000μL |
包 |
1 |
|
|
12. |
移液槍 |
10μL-100μL |
把 |
1 |
|
|
13. |
移液槍槍頭 |
10μL-100μL |
包 |
1 |
|
|
14. |
移液槍 |
2μL-20μL |
把 |
1 |
|
|
15. |
移液槍槍頭 |
2μL-20μL |
包 |
1 |
|
|
16. |
剪刀 |
|
把 |
1 |
|
|
17. |
鑷子 |
|
把 |
1 |
|
|
18. |
研缽 |
直徑8cm |
個 |
1 |
|
|
19. |
離心機 |
大龍D1008 |
臺 |
1 |
|
|
20. |
離心管 |
1.5mL |
個 |
50 |
|
|
21. |
PCR管 |
0.2mL |
個 |
50 |
|
|
22. |
非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑 |
48T/盒 |
盒 |
5 |
|
|
重 要 配 件 |
23. |
漩渦混勻器 |
|
臺 |
1 |
|
24. |
畜牧恒溫箱 |
-10℃~65℃ |
臺 |
1 |
|
|
25. |
高速冷凍離心機 |
LC-LX-HR165A |
臺 |
1 |
|
|
26. |
研磨儀 |
|
臺 |
1 |
|
|
27. |
移液器(5種型號) |
|
支 |
10 |
|
|
28. |
冰箱 |
|
臺 |
1 |
|
? 4 非洲豬瘟病毒(ASFV)實時等溫擴增儀技術參數(shù)
儀器型號 |
HW-ZW16 |
樣品通量 |
16x0.2ml,兼容單管和8聯(lián)管 |
加熱方式 |
半導體制冷片結合電性電阻熱紅外技術 |
溫控范圍 |
室溫~85℃ |
溫控精度 |
±0.1℃ |
溫度均一性 |
±0.15℃ |
激發(fā)光波長 |
第一通道:470nm±10nm |
檢測光波長 |
第一通道:520nm±10nm |
激發(fā)光 |
高亮度LED |
檢測器 |
新型光學檢測器,結合數(shù)字電路控制,光信號穩(wěn)定 |
熒光傳導方式 |
太空專用光纖傳導 |
結果判讀方式 |
根據(jù)擴增曲線軟件自動判讀陰陽性 |
結果顯示 |
可在機器顯示擴增曲線及出峰時間 |
檢測時間 |
≤40分鐘 |
檢測試劑 |
開放式恒溫熒光檢測試劑 |
操作軟件 |
自帶軟件 |
控制方式 |
觸屏控制 |
檢測項目 |
可同時最多檢測16個項目 |
檢測靈敏度 |
10~109拷貝/反應,且樣品間無交叉污染 |
儀器分析功能 |
根據(jù)所檢測樣品,直接分析判定陽性或陰性;也可通過標準品進行絕對定量 |
軟件設置功能 |
可選擇反應程序;可對反應程序進行設置,如可設置反應時間、可在反應過程中修改反應時間(縮短或延長)、可設置不同溫度,每個溫度檔位差為0.1℃;可將反應程序保存為模板;可對不同孔進行重命名;可設置掃描間隔時間,范圍為 18~60S,默認間隔為 60S;可設置陰陽性判斷閾值;閾值線可上下拉動等 |
工作環(huán)境溫度 |
18~35℃ |
儲存溫度 |
-20℃~55℃ |
環(huán)境相對濕度 |
≤85% |
工作電壓 |
100~240V,50~60Hz |
?5 非洲豬瘟病毒熒光等溫擴增檢測試劑盒技術參數(shù)
作用與用途:
用于血液、血球粉、淋巴結、脾臟、扁桃體以及豬肉產(chǎn)品中非洲豬瘟病毒核酸的檢測。
1.規(guī)格:
48次/盒;
2.保存條件:
-20℃保存;
3.組成:
熒光等溫擴增免提取反應液:1100ul;Bst DNA聚合酶:75ul;陰性對照:1000ul;陽性對照:200ul;礦物油:1000ul;說明書:1份;
4.有效期:
12個月;
5.檢測試劑盒應用范圍
本試劑盒適用于便攜式熒光定量PCR儀檢測箱及各種其他型號熒光定量PCR儀;
6.反應體系:
25ul;反應時間:1h;報告基團:FAM;淬滅基團:None;
7.結果判定:
有明確判定標準,被檢樣品熒光信號有指數(shù)型增長,陽性對照Tt值≤45并出現(xiàn)典型的擴增曲線,陰性對照無Tt值并且無擴增曲線即S型擴增曲線,結果成立;被檢樣品Tt值≤45并出現(xiàn)典型的擴增曲線為陽性;被檢樣品無Tt值并且無典型擴增曲線為陰性;被檢樣品Tt值在45-60之間并出現(xiàn)典型的擴增曲線為可疑。對于可疑結果應重新檢測,如果樣品FAM通道仍有典型S型擴增曲線且Tt值≤60,則判定為陽性,否則為陰性;
8.試劑盒特性
本試劑盒經(jīng)中國動物疫病預防控制中心評價,診斷敏感性100%,特異性100%;
9.推薦產(chǎn)品
該產(chǎn)品為疫控(診)【2019】74號文件中推薦的產(chǎn)品;
10. 產(chǎn)品資質
產(chǎn)品生產(chǎn)廠家具有分子生物學類診斷制品GMP車間。